Extraco de ADN a partir de tecido epitelial de lesma

O objetivo da pesquisa foi comparar trs protocolos: Extrao com SDS; Extrao com CTAB e 2-mercaptoetanol e Extrao com SDS e proteinase K, para determinar o mtodo mais adequado para obter DNA de alto peso molecular e pureza em tecido epitelial de lesma: subfoco Arion e Deroceras reticulatum. A concentrao e pureza de DNA foram estimadas espectrofotometricamente (absorvncia a 260 nm e relao Abs260/Abs280 nm). Foi utilizado um desenho completamente aleatrio com seis rplicas. Diferenas significativas (p<0,01) foram detectadas para quantidade, concentrao e pureza entre protocolos. o protocolo (sds e proteinase k) permitiu obter dna com maior peso molecular (2 514,90291,56) e pureza (1,970,02). a qualidade do dna de cada protocolo foi verificada por pcr-rapd, observando-se pouca reprodutibilidade para o primer opa-02 (protocolo sds); enquanto nos outros mtodos foram observados perfis de amplificao de alta resoluo e bandas reprodutveis. recomenda-se a utilizao do protocolo sds e da proteinase k, para obter dna genmico de alto peso molecular, qualidade e pureza em lesmas.