Estrazione del DNA dal tessuto epiteliale della lumaca

Lo scopo della ricerca stato quello di confrontare tre protocolli: estrazione con SDS; estrazione con CTAB e 2-mercaptoetanolo ed estrazione con SDS e proteinasi K, per determinare il metodo pi appropriato per ottenere DNA di alto peso molecolare e purezza nel tessuto epiteliale di lumache: Arion subfuscus e Deroceras reticulatum. La concentrazione e la purezza del DNA sono state stimate spettrofotometricamente (assorbanza a 260 nm e rapporto Abs260/Abs280 nm). stato usato un disegno completamente randomizzato con sei repliche. Sono state rilevate differenze significative (p<0,01) per quantit, concentrazione e purezza tra i protocolli. il protocollo (sds e proteinasi k) ha permesso di ottenere dna con peso molecolare pi elevato (2 514,90291,56) e purezza (1,970,02). la qualit del dna di ogni protocollo stata verificata mediante pcr-rapd, osservando poca riproducibilit per il primer opa-02 (protocollo sds); mentre negli altri metodi sono stati osservati profili di amplificazione ad alta risoluzione e bande riproducibili. si raccomanda di utilizzare il protocollo sds e la proteinasi k, per ottenere dna genomico di alto peso molecolare, qualit e purezza nelle lumache.