DNA-Extraktion aus Schneckenepithelgewebe

Das Ziel der Forschung war es, drei Protokolle zu vergleichen: Extraktion mit SDS; Extraktion mit CTAB und 2-Mercaptoethanol und Extraktion mit SDS und Proteinase K, um die am besten geeignete Methode zur Gewinnung von DNA mit hohem Molekulargewicht und hoher Reinheit in Schneckenepithelgewebe zu bestimmen: Arion subfuscus und Deroceras reticulatum. DNA-Konzentration und -Reinheit wurden spektrophotometrisch bestimmt (Absorption bei 260 nm und Verhltnis Abs260/Abs280 nm). Es wurde ein vollstndig randomisiertes Design mit sechs Wiederholungen verwendet. Signifikante Unterschiede (p<0,01) wurden fr menge, konzentration und reinheit zwischen den protokollen festgestellt. mit dem protokoll (sds und proteinase k) konnte dna mit hherem molekulargewicht (2 514,90291,56) und hherer reinheit (1,970,02) gewonnen werden. die qualitt der dna der einzelnen protokolle wurde mittels pcr-rapd verifiziert, wobei fr den opa-02-primer (sds-protokoll) eine geringe reproduzierbarkeit beobachtet wurde, whrend bei den anderen methoden hochauflsende amplifikationsprofile und reproduzierbare banden beobachtet wurden. es wird empfohlen, das sds-protokoll und proteinase k zu verwenden, um genomische dna mit hohem molekulargewicht, qualitt und reinheit in schnecken zu erhalten.