Extraction d'ADN partir du tissu pithlial de limace

L'objectif de la recherche tait de comparer trois protocoles : Extraction avec SDS ; Extraction avec CTAB et 2-mercaptothanol et Extraction avec SDS et protinase K, afin de dterminer la mthode la plus approprie pour obtenir de l'ADN de haut poids molculaire et de grande puret dans les tissus pithliaux des limaces : Arion subfuscus et Deroceras reticulatum. La concentration et la puret de l'ADN ont t estimes par spectrophotomtrie (absorbance 260 nm et rapport Abs260/Abs280 nm). Une conception compltement randomise avec six rptitions a t utilise. Des diffrences significatives (p<0,01) ont t dtectes pour la quantit, la concentration et la puret entre les protocoles. le protocole (sds et protinase k) a permis d'obtenir un adn de poids molculaire plus lev (2 514,90291,56) et de puret plus leve (1,970,02). la qualit de l'adn de chaque protocole a t vrifie par pcr-rapd, en observant une faible reproductibilit pour l'amorce opa-02 (protocole sds) ; tandis que dans les autres mthodes, des profils d'amplification haute rsolution et des bandes reproductibles ont t observs. il est recommand d'utiliser le protocole sds et la protinase k, pour obtenir un adn gnomique de poids molculaire lev, de qualit et de puret dans les limaces.