Quantifizierung von Proteinen mittels Protein Microarrays

Im Gegensatz zum Genom ist das Proteom hochvariabel. Es variiert nicht nur von Organismus zu Organismus, sondern auch zwischen verschiedenen Geweben und innerhalb eines Gewebes von Zelle zu Zelle. Grund hierfr sind unter anderem unterschiedliche Splicevarianten und posttranslationale Modifikationen (PTMs). Diese sind zeitlich begrenzt, sehr dynamisch und abhngig vom Zellzyklus oder externen Stimuli und beeinflussen die Proteinzusammensetzung einer Zelle. Zum Verstndnis von Signaltransduktionsevents gehrt die Analyse der zeitlichen und rumlichen Dynamik von posttranslationalen Modifikationen. Deswegen ist es von besonderem Interesse diese nderung der Verhltnisse mglichst genau zu untersuchen. Proteinbasierte Nachweismethoden, wie die Analyse mittels Reverse Phase Protein Microarrays, sind in der Lage nderungen des Proteoms direkt nachweisen zu knnen. Um dieses Ziel zu erreichen, wurde der gesamte Vorgang vom Herstellen der Microarrays, ber den Assay auf den Slides bis hin zur Auswertung optimiert. Es konnte gezeigt werden, dass die relative Quantifizierung mittels Reverse Phase Protein Microarrays mglich, jedoch von vielen Faktoren abhngig ist.