Optimierung der Produktion und Aufarbeitung von Glucose-6-phosphat Dehydrogenase und Hexokinase aus Bckerhefe

Diplomarbeit aus dem Jahr 2002 im Fachbereich Medizin - Biomedizinische Technik, Note: 2,0, Fachhochschule Jena (Medizintechnik), Sprache: Deutsch, Abstract: Inhaltsangabe:Einleitung:
Das Ziel dieser Diplomarbeit war es, ein Verfahren zur Herstellung der Enzyme Glucose-6-phosphat Dehydrogenase (G6P-DH) und Hexokinase (HK) aus Bckerhefe (Saccharomyces cerevisiae) fr die Anwendung zur Glucoseanalytik innerhalb eines Studentenpraktikums zu optimieren.
G6P-DH und HK werden z.B. zur quantitativen Glucosekonzentrationsbestimmung in Kulturbrhen oder zur Ermittlung des Blutzuckergehaltes und des Zuckergehaltes in Lebensmitteln eingesetzt.
In dem Studentenpraktikum sollen G6P-DH und HK von den Studierenden selbstndig aus Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) gewonnen werden, um damit den Einkauf dieser Enzyme einzusparen. Die isolierte G6P-DH und HK soll dann zur Glukosekonzentrationsbestimmung in der im folgenden Praktikum benutzten Kulturbrhe eingesetzt werden. Die Messung der Glucosekonzentration einer Zellkultur ist notwendig, um den Substratverbrauch und damit den Substratausbeutekoeffizienten zu ermitteln.
Weiterhin soll den Studierenden ein Vefahren zur Herstellung und Aufarbeitung von Enzymen im Rahmen ihrer Ausbildung vermittelt werden.
Fr das Praktikum werden Gerte verwendet, die der Fachhochschule Jena bereits zur Verfgung standen.
Zu beachten war, dass bei der Optimierung Aufwand und Kosten der Versuche in einem vernnftigen Verhltnis zu dem Nutzen in Beziehung standen. Um das Verfahren zu optimieren wurde es zunchst mit aus der Literatur oder empirisch gewonnenen Parametern durchgefhrt. Dann wurde versucht den oder die bottlenecks zu beseitigen. Hierzu wurden nacheinander die Stellen, die den grten Verlust an Enzym verursachten, optimiert. Dabei durfte jedoch das ideale Kosten-Nutzen-Verhltnis nicht aus den Augen verloren werden.
Vor Beginn der eigentlichen Versuche wurden die Optimierungsrandbedingungen festgelegt. Dies waren zum einen die An