Konstruktion und Charakterisierung rekombinanter bispezifischer Antikrper-Fragmente zur experimentellen Therapie der Hodgkinschen Krankheit

Diplomarbeit aus dem Jahr 2002 im Fachbereich Chemie - Biochemie, Note: 1,0, Universitt Bielefeld (Fakultt fr Chemie), Sprache: Deutsch, Abstract: Inhaltsangabe:Einleitung:
Ein CD30+-Hodgkin-Lymphom ist eine maligne Erkrankung, fr die eine Antikrpertherapie sehr vielversprechend ist. Ziel der Arbeit war es, fr einen solchen Therapieansatz aus den DNA-Sequenzen herkmmlicher rekombinanter bispezifischer Antikrper-Fragmente ein im Bezug auf Wirksamkeit und Stabilitt optimiertes Format herzustellen und zu charakterisieren. Zur Optimierung der Expression sollten zwei bispezifische Diabodies anti-CD16/CD30 bakteriell exprimiert und aufgereinigt werden. Die verbesserten Expressionseigenschaften einer Variante des bsDb gegen CD30 (mCD30) sollte durch den Vergleich mit dem Wildtyp bsDb besttigt werden.
Aus den scFv gegen CD30 und CD16 sollten anschlieend zwei bispezifische und tetravalente Tandemdiabodies mit unterschiedlichen Aminosure-Linkern generiert werden. Die Konstrukte der TandDb sollten ebenfalls exprimiert und aufgereinigt werden. Die Antikrper-Fragmente mit der Spezifitt anti-CD30/CD16 dirigiert NK-Zellen an H-RS-Zellen, initiieren die ADCC der NK-Zellen und fhrt zu einer spezifischen Lyse der H-RS-Zellen. Ein weiteres Ziel war es, die im Rahmen dieser Arbeit hergestellten rekombinanten Antikrper-Fragmente zu charakterisieren und im Rahmen eines in vitro-Cytotoxizittstests gegen eine etablierte Hodgkin Zelllinie die therapeutischen Wirksamkeit zu berprfen. Auf diese Weise sollten neuartige Formen rekombinanter Antikrper-Fragmente generiert und getestet werden, um die Grundlage fr eine effektive Antikrper-basierte Therapie fr die Hodgkinsche Krankheit zu etablieren.


Inhaltsverzeichnis:Inhaltsverzeichnis:
1.Einleitung1
1.1Die Hodgkinsche Krankheit1
1.2Molekularbiologische Eigenschaften von Hodgkin-und Reed-Sternberg-Zellen3
1.3Das CD30-Antigen5
1.4Cytotoxische Mechanismen von natrlichen Killerzellen7
1.5Struktur und Funktion von Immunglobu